Farklı karakterdeki BHK-21 hücrelerinin serumsuz vasattaki büyüme özelliklerinin tek tabaka kültür sisteminde incelenmesi


Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Eskişehir Osmangazi Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Fen Bil.Enst.Md.Lüğü, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2021

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: HAYDAR KARADAŞ

Eş Danışman: Şükran Yılmaz

Danışman: Muhammet Kaya

Özet:

Stocker ve Macpherson tarafından 1961 yılında Suriye Hamster yavrularının böbreğinden izole edilip polyoma virüs ile transforme edilerek oluşturulan BHK 21 C13 hücre hattı, virüs izolasyonu, aşı üretimi ve rekombinant protein üretimi gibi birçok alanda yaygın olarak kullanılmaktadır. Şap Enstitüsü’nde şap aşısı üretiminde farklı büyüme karakteristiğine sahip BHK 21 An30 ve BHK 21 An73 hücre hatları kullanılmaktadır. Üretim amaçlı tohum hücre stokları, monolayer kültür sisteminde %10 FBS’li GMEM besiyerinde çoğaltılmaktadır. Bu çalışmada, her iki hücre hattının serumsuz besiyerine adaptasyonu ve bu besin ortamının hücrelerin büyüme karakteristikleri üzerine etkisi incelenmiştir. Her iki hücre hattına da serumsuz vasatla ardışık seri pasajlar yapılarak, hücreler canlılık ve apoptoz, hücre döngüsü ve koloni oluşturma etkinliği yönünden analiz edilmiştir. Adaptasyon sonrası da büyüme eğrileri çıkartılarak, popülasyon ikilenme zamanları belirlenmiştir. Çalışmada %10 FBS’li GMEM besiyerinde büyütülen hücreler kontrol grubu olarak kullanılmıştır. Çalışma sonucunda %2 FBS’li Cellvento™ BHK-200 besi ortamında elde edilen hücre sayısının %10 FBS’li GMEM besi ortamından elde edilen hücre sayısından daha iyi olduğu görülmüştür. Yapılan apoptoz testi sonucunda her iki hücre hattında ve iki farklı besi ortamında belirgin bir farklılık olmamıştır. Ancak, pasaj sayısı arttıkça serumsuz besi ortamında büyütülen her iki hücre hattında da apoptotik hücre oranlarının azaldığı görülmüştür. Sonuç olarak, serumsuz vasat ile üretilen hücreler kontrol grubu ile karşılaştırıldıklarında, büyüme karakteristikleri yönünden istatiksel olarak anlamlı farklılık olduğu, serumsuz besi ortamına adapte olan hücrelerde canlılık oranlarının arttığı ve monolayer kültür sisteminde ana hücre bankalamasında kullanılabilirliği gösterilmiştir.