r-Klotho’nun Kolon Kanseri ve Normal Kolon Epitel Hücrelerinde MMP/TIMP Dengesi ve TNF-α Üzerine Etkileri


Creative Commons License

Uysal O., SENGEL T., Mahmudova L., Soykan M. N., SARIBOYACI A. E., Gunes S.

İzmir Kâtip Çelebi üniversitesi sağlık bilimleri fakültesi dergisi, cilt.11, sa.1, ss.193-198, 2026 (TRDizin) identifier

Özet

Amaç: Bu çalışma, rekombinant klotho (r klotho) proteininin insan kolon adenokarsinom hücreleri (Caco 2) ve normal kolon epitel hücreleri (CCD 841 CoN) üzerindeki etkilerini, özellikle hücre dışı matriks (ECM) yeniden yapılanması ve inflamasyonla ilişkili genlerin ekspresyonu açısından değerlendirmeyi amaçlamaktadır. Gereç ve Yöntem: Caco-2 ve CCD 841 CoN hücreleri dört ayrı deney grubu oluşturularak kültüre edilmiştir: CCD 841 CoN, Caco-2, r-klotho uygulanan CCD 841 CoN ve r-klotho uygulanan Caco-2. Önceki doz-yanıt çalışmamızda belirlenen 0,3 μg/mL r-klotho, 24 ve 48 saat süreyle uygulanmıştır. MMP-1, MMP-3, MMP-13, TIMP-1, TIMP-3 ve TNF-α genlerinin ekspresyon düzeyleri kantitatif gerçek zamanlı PCR (qRT-PCR) yöntemiyle analiz edilmiş ve GAPDH referans geni kullanılarak ΔΔCt yöntemiyle değerlendirilmiştir. Bulgular: Caco-2 hücrelerinde r-klotho uygulaması, MMP-1 ve TIMP-1 genlerinin ekspresyonunu anlamlı şekilde azaltırken (p
Objective: To evaluate the effects of recombinant klotho protein (r-klotho) on human colon adenocarcinoma cells (Caco-2) and normal colon epithelial cells (CCD 841 CoN), with a focus on extracellular matrix (ECM) remodeling and inflammation-related gene expression. Materials and Methods: Caco-2 and CCD 841 CoN cells were cultured in four experimental groups: CCD 841 CoN; Caco-2; r-klotho-treated CCD 841 CoN; and r-klotho-treated Caco-2. r-klotho was administered at 0.3 μg/mL, selected from a previous dose–response study as the concentration yielding the lowest relative viability in Caco-2 cells within the tested range, for 24 and 48 hours. Expression levels of MMP-1, MMP-3, MMP-13, TIMP-1, TIMP-3, and TNF-α were analysed using quantitative real-time PCR (qRT-PCR) and evaluated by the ΔΔCt method with GAPDH as the reference gene. Results: In Caco-2 cells, r-klotho significantly reduced MMP-1 and TIMP-1 expression (p