İn vitro hepatoselüler karsinoma kültür modelinin mezenkimal kök hücreler ile birlikte kurulması ve araştırılması


Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Eskişehir Osmangazi Üniversitesi, SAĞLIK BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ, KÖK HÜCRE ANABİLİM DALI, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2026

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: NARMIN ADIGOZALOVA

Danışman: HÜSEYİN AVCI, HAMED GHORBANPOOR

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Amaç: Bu çalışma, hücre kültürü koşullarında yetiştirilen Huh-7 hücre hattı ile mezenkimal kök hücre (MKH) ve EA.hy926 hücre hattı kullanılarak, karaciğer kanseri araştırmalarında bu hücrelerin etkinliği ve moleküler profillerinin ve proliferasyonlarının ayrıntılı biçimde incelenmesini amaçlamaktadır. Çalışma kapsamında altı kuyulu plakalar üzerine ekilmiş olan hücreler, ko-kültür koşullarında yetiştirilerek, hücresel davranışlar, canlı/ölü analizleri, immünofloresan (İF) analizleri aracılığıyla moleküler düzeyde karakterizasyon gerçekleştirilmiştir. Yöntem: Bu çalışmada Huh-7, mezenkimal kök hücreler ve EA.hy926 hücreleri standart kültür koşullarında çoğaltılarak ko-kültür modeli oluşturulmuş ve yedi gün inkübe edilmiştir. Hücre canlılığı canlı/ölü boyama yöntemiyle değerlendirilmiş, protein ekspresyonlarının analizi için İF uygulanmıştır. Ayrıca gen ekspresyon düzeylerini belirlemek amacıyla qRT-PCR analizi gerçekleştirilmiş ve Alfa-fetoprotein (AFP) ile Proliferasyon Hücre Nükleer Antijeni (PCNA) genlerinin ekspresyonları incelenmiştir. Elde edilen veriler ile hücrelerin canlılık, proliferasyon ve tümöral özellikleri moleküler düzeyde değerlendirilmiştir. Bulgular: Yedi günlük inkübasyon sonunda canlı/ölü hücre analizleri gerçekleştirilmiş ve kültür koşullarında %80'in üzerinde hücre canlılığı sağlanmıştır. qRT-PCR analizlerinde AFP ve PCNA gen ekspresyon düzeylerinde gruplara ve zaman noktalarına bağlı değişiklikler gözlenmiştir. İF boyamaları ise protein ekspresyonu ve hücresel aktivitedeki farklılıkları doğrulamıştır. Elde edilen veriler, oluşturulan ko-kültür modelinin hücresel canlılık ve fonksiyonel özellikler üzerinde etkili olduğunu göstermiştir. Sonuç: Yedi günlük inkübasyon sonunda canlı/ölü hücre analizleri gerçekleştirilmiş ve kültür koşullarında %80'in üzerinde hücre canlılığı elde edilmiştir. qRT-PCR analizlerinde ise AFP ve PCNA gen ekspresyon düzeylerinde anlamlı değişiklikler gözlenmiştir.