Seranib-2'nin akciğer kanseri hücre dizileri üzerindeki sitotoksik ve apoptotik etkilerinin belirlenmesi

---

Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Eskişehir Osmangazi Üniversitesi, FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ, BİYOLOJİ ANABİLİM DALI, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2016

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: MERVE YILDIZ

Danışman: AYŞE PINAR ÖZTOPCU VATAN

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Kanser hücrelerinde sfingolipid metabolizmasının ikincil habercilerinden olan seramid molekülünün miktarındaki artışın hücre bölünmesini durdurduğu ve apoptozun indüklenmesinde rol oynadığı daha önce yapılan çalışmalarla farklı hücre hatlarında gösterilmiştir. Seranib-2 seramidaz enzim inhibitörü olarak sentezlenen hücrede seramid miktarında artışa neden olan bir ajandır. Çalışmada ilk olarak seranib-2'nin ve pozitif kontrol olarak seçilen karboplatinin 1, 5, 10, 25, 50, 75 ve 100 µM dozlarının hücre çoğalması üzerindeki etkileri MTT yöntemiyle araştırılmıştır. Seranib-2'nin A549 hücrelerinde 24 ve 48 saatteki IC50 değerleri sırasıyla, 22 ve 18 μM; H460 hücrelerinde ise 8 ve 3 μM olarak hesaplanmıştır. Karboplatinin ise sadece H460 hücrelerinde 48 saatlik uygulamasında IC50 değeri 55 µM olarak hesaplanmıştır. Ardından her iki hücre hattında da seranib-2 ve karboplatin dozları 1:1 oranında kombine olarak uygulanmıştır. A549 hücrelerinde 24 saatte tüm dozlarda antogonistik etki, 48 saatte 1 ve 5 µM dozları dışında kalan diğer dozlarda sinerjistik etki görülmüştür. H460 hücrelerinde ise 24 saatte 10 ve 25 µM dozlarında sinerjistik etki görülürken, diğer dozlarda ve 48 saat uygulamalarında antogonistik etki gözlenmiştir. Seçilen seranib-2 dozlarının her iki hücrede DNA fragmentasyonunu arttığı, apoptotik fragmentasyonun nekrotik olana kıyasla daha fazla olduğu belirlenmiştir. H460 hücrelerinde seramidaz enzimin doza bağlı olarak seranib-2 tarafından baskılandığı ELISA yöntemiyle belirlenmiştir. Son olarak seçilen seranib-2 dozlarının her iki hücre hattında da apoptotik süreçle ilgili CASP3, CASP9 ve BAX genlerinin ifadesini artırırken, BCL-2 geninin ifadesini azalttığı gözlenmiştir. Sonuç olarak; seranib-2 dozlarının KHDAK hücre hatlarında hücre canlılığını doza ve zamana bağlı olarak azalttığı ve apoptozu indüklediği, karboplatin ile birlikte kombine denendiğinde oluşturduğu antagonistik/sinerjistik etkileşim ilk kez tespit edilmiştir.