Fisetin'in hücre çoğalması ve apoptoz üzerindeki etkisinin insan glioblastoma multiforme (T98G) hücre dizisinde araştırılması
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Eskişehir Osmangazi Üniversitesi, FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ, BİYOLOJİ ANABİLİM DALI, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2016
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: FULYA PAK
Danışman: AYŞE PINAR ÖZTOPCU VATAN
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Primer beyin tümörlerinin büyük bir kısmı glial kaynaklıdır ve bunların en tehlikeli türü glioblastoma multiforme (GBM)'dir. Kemoterapide kullanılan ilaçların az sayıda olması ve kullanılan ilaçlara karşı kanserli hücrelerin direnç geliştirmesi tedaviyi oldukça zorlaştırmaktadır. Fisetin, bitkilerde yaygın olarak bulunan doğal bir flavonoid çeşitidir. Yapılan araştırmalarda çeşitli kanser hücrelerinin çoğalmasını baskıladığı ve farklı mekanizmalarla apoptotik hücre ölümüne neden olduğu belirlenmiştir. Çalışmada ilk olarak 1, 50, 100, 200, 300, 400 ve 500 µM fisetin dozlarının T98G hücre morfolojisi üzerindeki etkileri ters ışık mikroskobu ile belirlenirken, hücre çoğalması üzerindeki etkileri MTT yöntemi ile incelenmiştir. 24 ve 48 saatteki IC50 değerleri sırasıyla, 93 ve 75 μM olarak hesaplanmıştır. Fisetinin normal hücreler üzerindeki morfolojik ve sitotoksik etkilerini belirlemek ve T98G hücreleri ile karşılaştırmak için BEAS-2B hücreleri kullanılmıştır. 24 ve 48 saatteki IC50 değerleri sırasıyla 270 ve 90 μM olarak hesaplanmıştır. Seçilen fisetin dozlarının her iki hücrede de, apoptotik fragmentasyonu nekrotik orana kıyasla daha fazla arttırdığı belirlenmiştir. T98G hücrelerinde 25 ve 50 μM fisetin dozlarının apoptozla ilgili KASPAZ 3, 9, 8 ve BAX genlerinin ifadesini artırırken, BCL-2 ve SURVIVIN genlerinin ifadesini azalttığı gözlenmiştir. BEAS-2B hücrelerinde ise KASPAZ 3, 9, 8, BAX, BCL-2 ve SURVIVIN genlerinin ifadesini 50 μM dozunda arttırırken, 100 ve 200 μM dozlarında azalttığı tespit edilmiştir. Ayrıca fisetinin T98G hücrelerinde yarattığı morfolojik değişiklikler TEM mikroskobuyla incelenmiştir. Çalışmada, fisetinin glioma hücrelerinde doza ve zamana sitotoksik ve apoptotik bir etkiye sahip olduğu ilk kez belirlenmiştir. Ayrıca normal hücreler ile karşılaştırıldığında fisetinin sitotoksik ve apoptotik etkilerinin glioma hücrelerinde daha güçlü olduğu tespit edilmiştir. Çalışma sonuçlarının fisetinin ileride glioma tedavisinde kullanılabilir bir ilaç olarak geliştirilmesinde yapılacak olan in vivo ve in vitro çalışmalara öncülük edeceğini düşünmekteyiz.