Şap virüsü izolasyonu ve teşhisi için fetal sığır dilinden hücre hattı oluşturulması ve karakterizasyonu
Tezin Türü: Doktora
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Eskişehir Osmangazi Üniversitesi, FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ, Fen Bil.Enst.Md.Lüğü, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2019
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: ŞÜKRAN YILMAZ
Danışman: Didem Turgut Coşan
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Bu tez çalışması ile şap virüsüne duyarlı, şap hastalığının teşhisini ve şap virüsünün izolasyonunu daha etkin kılacak alternatif yeni hücre hatları oluşturulması hedeflenmiştir. Böylece hem bu hücre hatlarının hastalığın doğal konakçısı ile aynı homolojiye sahip olması hem de ilk enfeksiyon belirtilerinin görüldüğü ve enfeksiyona duyarlı bir organ olan dilden hazırlanması nedeniyle şap virüsünün teşhisine ve izolasyonuna daha etkin katkı sağlayacağı düşünülmüştür. Çalışmanın birinci aşamasında, mezbahadan alınan yaklaşık 5 aylık sığır fötüsü dilinden, güvenli laboratuvar koşullarında hazırlanan primer kültürün ayrıştırma ve saflaştırılmasıyla, sonlu epitelyal ve fibroblast hücre hatları oluşturulmuştur. İkinci aşamasında, oluşturulan bu iki yeni hücre hattının karakterizasyonları kapsamında, mikrobiyal ve viral sterilite, büyüme karakteristiği, tür orijini doğrulaması, doku orijini doğrulaması testleri ve şap virüsü için spesifik hücresel reseptörlerin varlığının tespiti yapılarak tanımlı hücre hatları haline getirilmişlerdir. Üçüncü aşamasında ise yeni hücre hatlarının şap virüsü laboratuvar suşlarına ve (A TUR/11, O TUR/07 ve Asia1/11) ve BHK 21 An31 hücre hattında negatif olan 20 adet saha suşuna olan duyarlılıkları incelenmiştir. Çalışmalar sonucunda, FBTEC hücre hattının ömrünün 10 pasaj olduğu, FBTFC hücre hattının ise 60. pasaja kadar çoğaldığı görülmüştür. Yapılan virüs duyarlılık testlerinde, her iki hücre hattının da kontrol grubu olan BHK 21 An31 hücre hattından daha duyarlı olduğu görülmüştür. Ancak FBTEC hücre hattının ömrünün çok sınırlı olması bu hücre hattının uzun süreli kullanılabilirliğini sınırlamaktadır. FBTFC hücre hattı ise hem uzun süre pasajlanabilir olması hem de diploit hücre özelliğiyle atasal özelliklerini korumasından dolayı, iyi bir bankalama stratejisi ile daha uzun yıllar kullanılabilir yeni ve alternatif bir hücre hattı olmuştur. Anahtar Kelimeler: Hücre hattı kurulumu ve karakterizasyonu, sonlu hücre hattı, şap virüsü, teşhis, virüs izolasyonu